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鄭州PCR實驗室設計的基本規(guī)范有哪些?

發(fā)布者:中潤官網(wǎng) 發(fā)布時間:2021-06-10 16:12 閱讀:

  PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。它通過DNA基因追蹤系統(tǒng),迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其精確度高達納米級別。那么鄭州PCR實驗室設計的基本規(guī)范有哪些呢?

         PCR實驗室
  
  一、標準的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)
  
  將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區(qū),整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區(qū)設置有緩沖區(qū), 通過氣壓調(diào)節(jié),使整個PCR實驗過程中,試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
  
  PCR實驗室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實驗,通常應經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個實驗過程,若實驗工藝需要,還應增加樣品粉碎過程。
  
  進入實驗室區(qū)域工作人員應該按照以下路徑:
  
  公共清潔區(qū)——更衣間(更換潔凈服)——緩沖間——污染實驗區(qū)
  
  工作人員退出實驗室的路徑為:
  
  污染實驗區(qū)——緩沖間——淋浴間(有條件的可設置)——更衣間——公共清潔區(qū)

         PCR實驗室
  
  二、PCR氣流組織設計
  
  1、原始試劑混配室應為正壓間,在微環(huán)境百級超凈臺內(nèi)操作,須防止其它程序功能間對本操作間的污染。
  
  2、DNA提取室應為微負壓間,須設置排風系統(tǒng),以防止核酸提取時可能產(chǎn)生的氣溶膠對人員的侵害和對其它程序功能間的擴散污染。
  
  3、PCR擴增室應為微負壓間,須設置排風系統(tǒng),以防止大量擴增產(chǎn)物對其它程序功能間的擴散污染。
  
  4、檢測室應為微負壓間,須設置排風系統(tǒng),以防止擴增產(chǎn)物在電泳測序過程中的擴散污染。同時因3130分析儀散熱量較大,會提高室內(nèi)溫度3-5℃。
  
  5、試劑混配室、DNA提取室、PCR擴增室、檢測室如設置緩沖間,功能間內(nèi)可均為正壓,而在緩沖間內(nèi)設置負壓,氣流從其雙道門的門縫處分別向緩沖間內(nèi)流動,用合理的氣流組織方式避免各功能間的交叉污染。

         PCR實驗室
  
  三、PCR實驗室壓差設計
  
  PCR實驗室應設計為負壓潔凈室,通過壓差控制,使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染,并且降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
  
  各個實驗室與非潔凈區(qū)之間的閘間保持正壓,>10Pa,實驗與閘間之間的氣流組織方向為:試劑準備區(qū)空氣流向閘間,標本制備區(qū)流向閘間,而PCR擴增區(qū)氣流方向由閘間流向PCR擴增區(qū),純化區(qū)同理。
  
  同時按照試劑單向流方向,各個實驗室之間設計不同壓力梯度來實現(xiàn)單向氣流組織方向,由試劑準備區(qū)(+20Pa)、標本制備區(qū)(+15Pa)、擴增反應一區(qū)(-5Pa)、純化區(qū)(-10Pa)、擴增反應二區(qū)(-20Pa)、到后純化區(qū)(-25Pa)壓力逐漸降低,形成單向負壓壓力梯度。

         PCR實驗室
  
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