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鄭州PCR實(shí)驗(yàn)室可分為哪些工作區(qū)域？
發(fā)布者：中潤官網(wǎng) 發(fā)布時(shí)間：2021-07-01 15:17 閱讀：
PCR實(shí)驗(yàn)室在平面布局中可以分成四個(gè)單獨(dú)工作區(qū)域：試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。這四個(gè)區(qū)域是被嚴(yán)格劃分開的，有明顯的區(qū)域界線。為避免交叉污染，進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行，即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進(jìn)行。
試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)，該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目所使用的材料，如試劑與試劑原材料，標(biāo)本與標(biāo)本原材料等，這些都必須存放于本區(qū)內(nèi)。至于是否需要控制氣流壓力，本區(qū)倒是沒有嚴(yán)格要求。
標(biāo)本制備區(qū)，該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定DNA的合成。注意事項(xiàng)是為了防止鄰近區(qū)域的空氣進(jìn)入本區(qū)，壓力梯度對(duì)比鄰近區(qū)域要設(shè)置成正壓。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的操作時(shí)，工作人員要避免不必要的走動(dòng)，以防止加樣操作中發(fā)生氣溶膠污染。
擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)，該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為DNA擴(kuò)增。此外，已制備的DNA模板 (來自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增的污染指數(shù)比較高，壓力梯度對(duì)比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負(fù)壓，這樣做的好處是能有效防止氣溶膠從本區(qū)泄漏。
擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測定。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)時(shí)如果已經(jīng)預(yù)設(shè)了全自動(dòng)封閉分析儀器，那么就沒有必要再劃分本區(qū)了。本區(qū)的壓力梯度對(duì)比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負(fù)壓，這樣做的好處是能有效防止擴(kuò)增產(chǎn)物擴(kuò)散至其它區(qū)域。
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